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色谱仪器和色谱消耗品
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低压色谱(LPLC)柱压一般低于5bar(或75psi)。如果柱床出现松动塌陷,无需任何工具,只需轻轻旋动顶端加压装置,便能恢复原柱内压力和柱效。 低压色谱一般是由蠕动泵、进样阀和检测器组成,可以连续化,实现自动的梯度淋洗和馏分收集等操作。色谱柱管一般是玻璃或聚合物材料的,长度一般为240-440mm,内径为10-40mm。 对于大多数在紫外区有吸收的物质,光学检测器很常用。填料一般使用软质的葡聚糖、琼脂糖、纤维素、合成高聚物或离子交换剂,粒径一般为40-60μm。


LC-100液相色谱系统分析前准备:  1、流动相前处理:将流动相经过0.45um的微孔滤膜过滤后,倒入流动相瓶中,放入超声波清洗器内震荡排气20分钟左右。如果检测器内有残留气泡,会有特别明显的表现形式,就是在走基线时会时不时间隔出现直上直下信号很大的信号峰。  2、流动相安装:将处理好的流动相放在储液托盘上,将对应通道的洗液管路分别放入流动相瓶中,盖好瓶盖并记好对应通道的流动相种类。  3、样品记录:将样品处理稀释后使用注射1器过滤头过滤后装入1.5ml样品瓶中(大约三分之二),放入自动进样器的样品架上,并记录样品瓶位置以便设置批处理文件。  4、色谱柱安装:打开柱温箱门,将色谱柱的出口端安装在色谱柱夹具上,在色谱柱上连接配管,在色谱柱出口端连接检测器入口端的蓝色PEEK管。  5、检查清洗液:在RINSE通道内放置50%甲1醇:水溶液;含有两根管路的通道内放置10%异丙1醇:水溶液。


如何预防液相色谱仪液相泵的故障:  要保持泵的良好操作性能,必须维护系统的清洁,保证溶剂和试剂的质量,对流动相进行过滤和脱气.下面列出预防泵故障的几项措施:  1、用高质量试剂和HPLC级溶剂;  2、过滤流动相和溶剂;  3、脱气;  4、每天开始使用时放空排气,工作结束后从泵中洗去缓冲液;  5、不让水或腐蚀性溶剂滞留泵中;  6、定期更换垫圈;  7、需要时加润滑油;  8、查阅有关泵操作手册中的其它建议。  处于良好操作状态的泵,应该能使色谱图上的基线平稳;保留时间的重复性好。洗脱除另有规定外,通常按流动相洗脱能力大小,递增变换流动相的品种和比例,分别分部收集流出液,至流出液中所含成分显著减少或不再含有时,再改变流动相的品种和比例。在等度洗脱时压力波动小于2%。梯度洗脱时压力变化应是缓慢和平稳的。  为了使故障发生后尽除,平时应常备密封、单向阀、泵头装置、各式接头、保险丝等部件,以及更换工具。



随着柱填料的快速发展,反相色谱法的应用范围逐渐扩大,现已应用于某些无机样品或易解离样品的分析。接通载气当色谱柱与进样口接好后,通载气,调节柱前压以得到合适的载气流速。为控制样品在分析过程的解离,常用缓冲液控制流动相的pH值。但需要注意的是,C18和C8使用的pH值通常为2.5~7.5(2~8),太高的pH值会使硅胶溶解,太低的pH值会使键合的脱落。有报告新商品柱可在pH 1.5~10范围操作。

正相色谱法与反相色谱法比较表

正相色谱法 反相色谱法

固定相极性 高~中 中~低

流动相极性 低~中 中~高

组分洗脱次序 极性小先洗出 极性大先洗出







发布时间:2020-07-19
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